項目描述:課題職責:在導師指導下選定課題、查閱文獻、撰寫開題報告、擬定實驗方案。
課題說明:以東太平洋海隆地區深海熱液口沉積物樣品的宏基因組數據,選取了 8個疑似脂水解酶基因利用現代酶基因挖掘技術對脂水解酶est-OK系列基因進行克隆、表達以及酶學性質的研究。
實驗證明:八個潛在新型脂水解酶基因est-OK系列均成功在大腸桿菌Escherichia coliBL21(DE3)中進行了重組表達。然后檢測粗酶酶活,對檢測到粗酶酶活的est-OKK進行鎳柱親和純化,最后進行酶動力學研究表明。結果表明脂水解酶est-OKK為酯酶,最適底物為對硝基苯丁酸酯,酶動力學參數Vmax和Km值分別為161.3 U/mg和483μM。進一步的酶動力學研究表明est-OKK具有一定的溫度穩定性,極強的堿穩定性,較高的鹽耐受性。